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【目的】觀察類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis,RA)模型大鼠,在針刺和艾灸干預(yù)下體質(zhì)量、右后足跖度腫脹度的變化,血清中IL-17、MMP-9、T I M P-1含量表達(dá)的變化,以期闡明針灸通過調(diào)控細(xì)胞因子方面,發(fā)揮改善RA病癥的作用。同時觀察對同一腧穴組合的針刺和艾灸刺激,是否具有相當(dāng)?shù)闹委熥饔谩獒樉闹委燁愶L(fēng)濕關(guān)節(jié)炎及風(fēng)濕免疫方面相關(guān)疾病提供科學(xué)的實驗室依據(jù)?!痉椒ā縎 P F級雄性大鼠,5 0只,稱重、編號,去除兩極體質(zhì)量(1 0只),依完全隨機數(shù)字表法分成4組,空白組、模型組、針刺組、艾灸組,每組1 0只。用苦味酸染色劑對各組大鼠進(jìn)行染色編號。除空白組外于右后足跖皮內(nèi)注射0.15ml弗氏完全佐劑(Freund’s complete Adjuvant,FCA)誘發(fā)佐劑型關(guān)節(jié)炎(Adjuvant arthritis,AA)大鼠模型。大鼠右后足跖部明顯腫脹通常在24h后即可出現(xiàn),7d后用上法免疫加強,21d后繼發(fā)性炎性反應(yīng)成熟穩(wěn)定,在前肢或?qū)?cè)肢體甚至耳、尾部相繼出現(xiàn)紅腫或炎性結(jié)節(jié),提示造模成功??瞻捉M則大鼠右后足跖部,酒精消毒后,注射0.15ml的0.9%Na Cl溶液。治療干預(yù)選用“三部針刺法”的背部:大椎、命門;上肢部:合谷、曲池;下肢部:陽陵泉、三陰交、足三里;針刺組給予針刺留針20min,艾灸組每一腧穴距離2cm懸灸20min,每天1次,7天為1療程,間隔1天后,再行第2療程。于造模前后、治療1周后、治療2周后觀察和測量各組大鼠的體質(zhì)量和右后足跖腫脹度。治療結(jié)束后采血,ELISA法檢測大鼠血清中IL-17、MMP-9、TIMP-1含量?!窘Y(jié)果】(1)與空白組比較造模后,模型組、針刺組、艾灸組大鼠右足底及踝關(guān)節(jié)相繼出現(xiàn)腫脹,食量減少,毛發(fā)雜亂無光澤,體質(zhì)量增加減慢(P<0.05),右后足跖部腫脹度增加(P<0.05)。治療干預(yù)后,針刺組與艾灸組大鼠體質(zhì)量增幅小(P<0.0 1),右后足跖部腫脹度增幅小;模型組無干預(yù),體質(zhì)量增幅大(P<0.05),右后足跖部腫脹度明顯增加(P<0.05)。上三組大鼠血清中IL-17、MMP-9、T I M P-1含量皆上升(P<0.0 5)。(2)與模型組比較造模后,針刺組、艾灸組體質(zhì)量、右后足跖部腫脹度無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。治療干預(yù)1周、2周后,針刺組、艾灸組體質(zhì)量均增幅減緩(P<0.05),右后足跖部腫脹度均減小(P<0.05),血清中IL-17、MMP-9、TIMP-1含量均下降(P<0.05)(3)與艾灸組比較干預(yù)后,針刺組體質(zhì)量變化、右后足跖部腫脹度改善程度與艾灸組相當(dāng),無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。針刺組大鼠血清中IL-17含量表達(dá)與艾灸組相當(dāng),無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05),MMP-9、TIMP-1含量下降明顯,有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)?!窘Y(jié)論】1.在本實驗腧穴組合的基礎(chǔ)上,針刺和艾灸治療都能夠改善大鼠的關(guān)節(jié)腫脹度,且兩者的治療效果相當(dāng)。2.針刺和艾灸能夠有效地降低I L-1 7在R A模型大鼠血清中的表達(dá),抑制Th17細(xì)胞的分化,抑制滑膜細(xì)胞活化后與IL-1、TNF-α產(chǎn)生協(xié)同作用,抑制MMP及其他促炎因子的分泌。從而防止骨和軟骨破壞。3.針刺和艾灸治療皆能夠有效的下調(diào)M M P-9、T I M P-1在血清中的表達(dá),維持其平衡,控制滑膜炎癥的發(fā)生,且針刺下調(diào)明顯,優(yōu)于艾灸。
三部針刺法; 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎; 佐劑型關(guān)節(jié)炎模型; IL-17; MMP-9; TIMP-1; 艾灸;
IL-17 ELISA試劑盒、MMP-9 ELISA試劑盒、TIMP-1ELISA試劑盒 武漢默沙克生物科技有限公司