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鹿茸自古以來是我國貴重的藥材，主要功效有補(bǔ)腎填精、強(qiáng)筋健骨、調(diào)節(jié)機(jī)體，對(duì)耳聾耳鳴也有著不錯(cuò)的治療效果。研究表明鹿茸具有抗炎的作用功效，本研究圍繞鹿茸多肽的抗炎活性展開。
首先取新鮮的雙陽梅花鹿（Cervus nippon）鹿茸，分別用超聲助提法和CO2 超臨界提取法提取鹿茸蛋白多肽。通過比對(duì)不同提取工藝的提取率，進(jìn)一步確定鹿茸總蛋白的提取工藝: 超聲助提法對(duì)鹿茸總蛋白的提取率為2.81%，CO2 超臨界提取法對(duì)鹿茸總蛋白的提取率為3.93%，CO2 超臨界提取法對(duì)鹿茸總蛋白的提取率要優(yōu)于超聲助提法的提取率。將提取出的鹿茸蛋白分別通過胃蛋白酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶及復(fù)合蛋白酶（堿性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶復(fù)合物）進(jìn)行酶解，并通過單因素分析及甲醛滴定法確定鹿茸酶解的最佳工藝，得到最佳酶解工藝為：以鹿茸蛋白為水解底物，其濃度為3%，通過復(fù)合酶酶解，酶解溫度為50℃、酶解時(shí)間為3h。
構(gòu)建小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（NIH3T3）細(xì)胞抗炎模型，對(duì)各種工藝酶解后的鹿茸多肽抗炎效果進(jìn)行評(píng)估。各工藝酶解后的鹿茸多肽在給藥25mg 時(shí)抗炎效果最佳，其抗炎效果為：復(fù)合酶酶解后鹿茸多肽抗炎活性>中性蛋白酶酶解后鹿茸多肽抗炎活性>胰蛋白酶酶解后的鹿茸多肽抗炎活性>堿性蛋白酶酶解后的鹿茸多肽抗炎活性>胃蛋白酶酶解后鹿茸多肽抗炎活性>未酶解鹿茸總蛋白抗炎活性。之后對(duì)復(fù)合酶酶解后得到的鹿茸多肽進(jìn)行SDS-PAGE 凝膠電泳，從凝膠電泳結(jié)果我們看出經(jīng)過復(fù)合酶酶解后，大分子鹿茸多肽被大量酶解，酶解后的鹿茸多肽分子量大約在4~15kDa。
經(jīng)過復(fù)合酶酶解后的鹿茸多肽通過凝膠層析法分離出20 種單體多肽，通過構(gòu)建NIH3T3 體外細(xì)胞抗炎模型對(duì)20 種多肽的抗炎活性進(jìn)行考察，共計(jì)篩選出13 種具有抗炎活性的多肽，將此13 種具有抗炎活性的多肽進(jìn)行測(cè)序，并與NCBI 數(shù)據(jù)比對(duì)，分析其功能。在給藥計(jì)量相同的情況下將13 種多肽的抗炎效果與復(fù)合酶酶解后的鹿茸多肽抗炎活性進(jìn)行比對(duì)，得出結(jié)論單體多肽的抗炎活性低于復(fù)合酶酶解后的鹿茸多肽抗炎活性，我們推斷鹿茸的抗炎效果是多種多肽共同作用的結(jié)果，單一蛋白多肽并不能有效的抑制炎癥發(fā)生。
本研究為鹿茸的利用及其相關(guān)鹿茸產(chǎn)品的開發(fā)奠定了一定基礎(chǔ)，對(duì)鹿業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展有重要意義。對(duì)鹿茸中有效物質(zhì)的功效研究及鹿茸產(chǎn)品開發(fā)提供思路和理論依據(jù)，并奠定一定的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。
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